使用层流净化手术室过程中，一切活动均应遵守无菌原则，不可掉以轻心。

　　1.参加手术的每一个人员。一且发现自己或他人有违反无菌原则的情况，应该随即指出并纠正。洁净手术部技术规定多数是根据满足空气净化的要求制订的。

　　2.手术时应避免无关的言谈，更不准说笑。咳嗽或打喷嚏时，应将头偏向一侧或后方。不能对向手术区。手术过程中，病人体弱，情绪紧张，而医护人员则处于紧张的工作状态，双方对空气调节的舒适性要求的差距就很大。即使病人和病人之间，医护人员彼此之间，由于个体差异很大，统一不变的规定是很难满足整个手术过程的要求的。

　　3.参加手术人员应始终注愈保持手嘴及胸前无菌，不可随意转身，以防背后有菌处污染他人或无菌区。

　　4.手术人员术中临时需更换位置时，应背对背换位。

　　5.传递器械及用品不能超出无菌区，应在胸前进行，不能在腋下及背后传递。

　　6.手套有破损时，应立即更换。

　　7.面部出汗时，应请台下人协助擦去，不能让汗珠落入手术区。

　　8.术中取出的带菌组织要放在固定处，不能随意触摸;用过的污染器械，不可在无菌范围内使用，用过也应放在固定处，不能在手术台上随处放置。

　　9.洁净手术部的空调及净化设备的选型，应以国家的规范、标准为指导，有足够的容量，并要配合、灵敏的自动控制系统，才能适应手术过程的需要。

10.层流净化手术室的工作环境变化大，特别是教学医院，实习学员、迸修医生多，手术过程中，人员进出会引起手术室各种技术参数的较大变化，各个数据难以恒定。